【介紹】
Biolistic PDS–1000/He 基因槍系統(tǒng)主單元。主轉(zhuǎn)化室（右）包括微粒發(fā)射裝配和轟擊氦壓力計(jì)（上）。中央測(cè)量計(jì)（左）監(jiān)控轉(zhuǎn)化室內(nèi)的真空狀態(tài)，下面兩個(gè)旋鈕用于調(diào)節(jié)真空流和排氣速率。
Biolistic PDS–1000/He 基因槍系統(tǒng)將微米大小的、包被有核酸的金或鎢微粒加速到所需要的速度，從而將基因?qū)爰?xì)胞、組織或器官。這一過(guò)程既不依賴也不作用于細(xì)胞表面。系統(tǒng)利用高壓氦氣的轟擊，來(lái)推動(dòng)攜帶有微粒的塑料大顆粒載體盤(pán)朝目標(biāo)細(xì)胞方向加速。推進(jìn)大顆粒載體的氦氣壓力由所使用的不同破裂盤(pán)決定。破裂盤(pán)是一種可在特定壓力下破裂的塑料密封體。終止屏可阻止大顆粒載體，使微�？梢酝ㄟ^(guò)和轉(zhuǎn)染靶細(xì)胞。為了提高這一進(jìn)程的效率，可抽空轉(zhuǎn)化室，使壓力低于大氣壓力，從而當(dāng)微粒打向靶細(xì)胞時(shí)可減少其摩擦阻力。
Biolistic PDS–1000/He 系統(tǒng)能提供：
一種可重復(fù)的、轉(zhuǎn)化完整培養(yǎng)細(xì)胞的方法，幾乎無(wú)需對(duì)細(xì)胞進(jìn)行處理
用其它方法不能完成的，有特殊生長(zhǎng)需要的細(xì)胞轉(zhuǎn)化
實(shí)驗(yàn)過(guò)程的最大控制
高重復(fù)性
轟擊參數(shù)*
| 細(xì)胞類(lèi)型 |
真空
(inches Hg) |
目標(biāo)間距
(cm) |
氦氣壓力
(psi) |
顆粒大小 |
| 細(xì)菌 |
29 |
6 |
1,100 |
M5 鎢 |
| 酵母菌 |
28 |
6 |
1,300 |
0.6 µm 金 |
| 藻類(lèi) |
29 |
6 |
1,300 |
0.6 µm 金 |
| 植物 |
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| 胚芽 |
28 |
6 |
1,300 |
1.0 µm 金 |
| 愈傷組織或愈傷組織或 |
28 |
9 |
1,100 |
1.0 µm 金 |
| 細(xì)胞器 |
28 |
6 |
1,300 |
0.6 µm 金 |
| 動(dòng)物 |
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| 組織培養(yǎng) |
15 |
3 |
1,100 |
1.6 µm 金 |
| 組織切片 |
25 |
9 |
1,100 |
1.6 µm 金 |
* 我們推薦這些設(shè)定作為多種細(xì)胞類(lèi)型的起始轟擊參數(shù)。許多因素會(huì)影響轟擊效率，但對(duì)于多數(shù)用戶來(lái)說(shuō)，分別優(yōu)化主要變量再小幅調(diào)整以測(cè)試它們的相互影響，就足以獲得滿意的結(jié)果。
PDS–1000/He Hepta 適配器
PDS–1000/He 基因槍系統(tǒng)加上Hepta 適配器后，可以比標(biāo)準(zhǔn)系統(tǒng)多轉(zhuǎn)化7–10 倍的細(xì)胞。它配接PDS– 1000/He 系統(tǒng)的沖擊室，將氦氣沖擊波分導(dǎo)至7 個(gè)大顆粒載體處。這樣，通過(guò)在更大面積上均一地分散DNA 包被的金粉或鎢粉，增加了這個(gè)系統(tǒng)一次轟擊的細(xì)胞數(shù)。當(dāng)氦氣被分成7 道時(shí)，降低了壓力和顆粒速度，該系統(tǒng)特別適合不太需要強(qiáng)大穿透力的植物和培養(yǎng)細(xì)胞。
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